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熒光顯微鏡放大倍數
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北京長恒榮創科技

時間 : 2021-02-01 15:07 瀏覽量 : 124

    熒光顯微鏡是指將紫外線作為光源,使其照射在樣品上,并使得樣品發光,從而實現觀察的一種顯微鏡,用于生物領域中研究細胞內物質的吸收、運輸、化學物質的分布及定位等的工具。

    熒光顯微鏡放大倍數與分辨率

    熒光顯微鏡有兩個關鍵的概念,其一是放大倍數,其二是分辨率。

    熒光顯微鏡放大倍數

    在熒光顯微鏡的觀察應用中,為了獲得良好的結果,用戶需要對顯微鏡的放大倍數有一定的了解,顯微鏡的放大倍數就是指在我們在顯微鏡下觀察一個樣品時,成像之后比原本放大了多少。

    分辨率

    而在熒光顯微鏡中,分辨率剛好與其相反,實際意義上的分辨率指的是樣品成像之后,圖片能夠呈現出樣品的多少細節,這可能是主觀的,在技術層面上,分辨率受到光的折射特性的限制。

    熒光顯微鏡放大倍數與分辨率

    熒光顯微鏡還有一個概念是極限分辨率,它指典型的落射熒光照明復合顯微鏡無法分辨或區分距離小于200nm的兩個物體。此外,因為整個樣品被同時照射,所以樣品中所有聚焦和離焦的光線都被檢測到。這些限制意味著,根據物鏡中的鏡片,可能能夠確定一個細胞中的兩個不同顏色的探針,但是如果沒有很多對照、單像素分析和計算,就無法分辨它們之間的空間關系。

    熒光顯微放大倍數與標尺之間的對應關系

    50x標尺每一格代表20μm

    100x標尺每一格代表10μm

    200x標尺每一格代表5μm

    400x標尺每一格代表2.5μm

    500x標尺每一格代表2μm

    1000x標尺每一格代表1μm

    微鏡的物鏡放大倍數允許有5%的誤差,所以使用前需要校準,步驟是:把物鏡測微尺(劃分為100小格,0.01mm/格)放在載物臺上,然后用相應倍率的物鏡和10*刻度目鏡(內有0.1mm格值的刻度尺)調焦成象后,進行觀察,物鏡測微尺與目鏡刻度尺重合的格數*0.01/目鏡刻度尺的格數即為物鏡在此倍率下每個刻度值的實際長度。

    物鏡和目鏡加在一起標定總放大倍數。用物鏡測微尺當試樣看,上面有個1mm的尺子,分成100個小格,一個小格是10微米。你用帶有目鏡測微尺的目鏡去量上面標尺的長度,量出來數值,除以1mm真實長度,不就知道放大倍數了么。經常有單位說顯微鏡要讓計量局來計量。其實顯微鏡是分析儀器,不是強檢儀器。有時計量局來人計量,主要就是干這個活,計量你的放大倍數是不是在誤差之內。


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